ПЦР метод
В режиме "реального времени"
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это наиболее точный и современный метод диагностики лямблиоза, при котором происходит регистрация ДНК лямблий в кале.
Метод имитирует естественную репликацию ДНК и позволяет обнаружить только специфичную для данного вида молекулу ДНК в присутствии других молекул. Открытие метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) стало одним из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Это позволило поднять медицинскую диагностику на качественно новый уровень.
Метод ПЦР позволяет обнаружить возбудителя инфекции, проникшего в организм, даже если в биологическом материале, сданном для анализа, присутствуют лишь фрагменты его ДНК.
Метод ПЦР уже довольно давно зарекомендовал себя как эффективный, высокочувствительный и высокоспецифичный диагностический инструмент.
Метод имитирует естественную репликацию ДНК и позволяет обнаружить только специфичную для данного вида молекулу ДНК в присутствии других молекул. Открытие метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) стало одним из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Это позволило поднять медицинскую диагностику на качественно новый уровень.
Метод ПЦР позволяет обнаружить возбудителя инфекции, проникшего в организм, даже если в биологическом материале, сданном для анализа, присутствуют лишь фрагменты его ДНК.
Метод ПЦР уже довольно давно зарекомендовал себя как эффективный, высокочувствительный и высокоспецифичный диагностический инструмент.
Преимущества метода
- Низкая цена для пациента.
- Высокая специфичность. Достигается благодаря мишени — высокоспецифичного для конкретного вида участка ДНК.
- Исключен человеческий фактор. Результат регистрирует аппарат. Есть система контроля качества, благодаря которой валидируется протокол результатов. В ходе выполнения анализа производится программный обсчет. В том числе, по характерным кривым на графике изменения флюоресценции.
- Минимальное влияние ингибиторов благодаря очистке образца на стадии экстракции нуклеиновых кислот. На получение валидных результатов не влияет наличие в кале примесей. ДНК является достаточно устойчивой мишенью. Возможность работы со «сложными» образцами.
- Доставка и хранение биоматериала в лабораторию имеют более мягкие условия и более удобные для пациентов (см. ниже).
недостатки метода
- Анализ необходимо проводить 1−2 раза для получения достоверного результата.
- Особые требования к лаборатории.
- Требуется специальное оборудование и подготовка специалистов.
Требования к отбору и хранению кала
- МатериалКал после естественной дефекации. Фекалии необходимо забирать из нескольких мест пипеткой, лопаточкой или рабочей частью зонда-тампона.
Для сбора кала можно использовать подкладное судно или горшок. Емкость следует предварительно хорошо вымыть с мылом. Многократно ополоснуть проточной водой, обдать кипятком, высушить.
Запрещено отбирать пробу из унитаза. - Объем пробы~1,0–3,0 г (~1,0–3,0 мл).
Отобрать пробу в количестве не более 1/3 объема контейнера. - Тара для биоматериалаДля сбора биоматериала необходимо использовать специальный стерильный сухой контейнер (или флакон) с крышкой и лопаточкой. Такой контейнер можно приобрести в аптеке.
- ПодготовкаОсобая подготовка пациента к исследованию: не требуется.
- Доставка в лабораториюБиоматериал следует хранить при комнатной температуре от 18 °C до 25 °C не более 4 часов или в холодильнике при температуре 2…8°С не более 24 часов.
Биоматериал должен быть доставлен в медицинское учреждение в течение суток.
